粗脂肪測(cè)定的兩種方法比較

 

       粗脂肪是指飼料、動(dòng)物組織、動(dòng)物排泄物中脂溶性物質(zhì)的總稱(chēng)。粗脂肪與脂肪概念不同，它涵蓋的內(nèi)容要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于脂肪。通常粗脂肪的測(cè)定，有抽提法和酸水解法，當(dāng)然，現(xiàn)在還有更為方便的途徑，那就是直接用粗脂肪測(cè)定儀，它有多種型號(hào)，如SZF-06B粗脂肪測(cè)定儀，SZF-06粗脂肪測(cè)定儀和SZF-06A粗脂肪測(cè)定儀。

       下面我們來(lái)具體看下抽提法和酸水解法測(cè)定粗脂肪的原理、試劑儀器等相異之處。

抽提法：本法為重量法，用脂肪溶劑將脂肪提出后進(jìn)行稱(chēng)量，該法適用于固體和液體樣品。通常將樣品浸于脂肪溶劑，為乙醚或沸點(diǎn)30℃至60℃的石油醚，借助于索氏提取器進(jìn)行循環(huán)抽提。用本法提取的脂肪性物質(zhì)為脂肪類(lèi)物質(zhì)的混合物，其中含有脂肪游離脂肪酸、磷脂酯、固醇、芳香油某些色素及有機(jī)酸等。因此，稱(chēng)為粗脂肪。

酸水解法：樣品經(jīng)酸水解后用乙醚提取，除去溶劑即得游離及結(jié)合脂肪總量。

抽提法：無(wú)水乙醚、海砂、索氏提取器、恒溫水浴鍋、烘箱、脫脂棉花、脫脂濾紙

酸水解法：鹽酸、95％乙醇、乙醚、石油醚、100毫升具塞刻度量筒

抽提法：(一)樣品的準(zhǔn)備

    稱(chēng)取樣品的重量根據(jù)材料中脂肪的含量而定,通常脂肪含量在10％以下的，稱(chēng)取樣品10-12克;脂肪含量為50-60％的，則稱(chēng)取樣品2-4克，(可以用測(cè)定水分后的樣品)。

    將樣品在80-100℃烘箱去水分。一般烘4小時(shí)，烘干時(shí)要避免過(guò)熱。冷卻后，準(zhǔn)確地稱(chēng)取一定量樣品，必要時(shí)，拌以精制海砂，無(wú)損地移入濾紙筒內(nèi)，用脫脂棉塞嚴(yán)，將濾紙筒放人索氏提取器的提取管內(nèi)，注意勿使濾紙筒高于提取管的虹吸部分。

    (二)抽取   

    將洗凈的提取瓶在1.5℃烘箱內(nèi)烘干至恒重,加乙醚約達(dá)到提取瓶容積的1／2-2／3，然后將提取器各部分按圖連接，注意不能漏氣。

    加熱提取時(shí)，應(yīng)在電熱恒溫水浴中進(jìn)行(水浴溫度約為40-50℃)也可以使用燈泡或電爐加熱的水浴鍋，嚴(yán)禁用火焰直接加熱索氏提取器。

在加熱時(shí)乙醚蒸發(fā)，乙醚蒸汽由連接管上升至冷凝器，凝結(jié)成液體滴入提取管中，此時(shí)樣品內(nèi)的脂肪為乙醚液面超過(guò)虹吸管高度后溶有脂肪的乙醚虹吸管流入提取瓶，為此循環(huán)抽提，調(diào)解水域溫度，使乙醚每小時(shí)循環(huán)3－5次，提出時(shí)間視樣品的性質(zhì)而定，一般需6－12小時(shí)，樣品含有脂肪是否提取完全，可以用濾紙來(lái)粗略判斷，從提取管內(nèi)吸取少量的乙醚并滴在凈的濾紙上，待乙醚干后，濾紙上不留有油脂的半點(diǎn)則表示已經(jīng)提取完全。

提取完全后，再將乙醚蒸到提取管內(nèi)，待乙醚液面達(dá)到虹吸管的最高處以前，取下提取管。

（三）稱(chēng)重和計(jì)算

將提取瓶中的乙醚全部蒸干，洗凈外壁，置于105℃烘箱干燥至恒重，按下式計(jì)算樣品的促脂肪百分含量。

脂肪（﹪）=( W1-W0)/W×100

W1：接受瓶和脂肪重量（克）。

W：樣品重量（克）。

W0：接受瓶重量（克）。

酸水解法：1、樣品處理： (1)固體樣品：精密稱(chēng)取約2克水，混勻后再加重。毫升鹽酸。置于50毫升大試管內(nèi)，加8毫升；(2)液體樣品：稱(chēng)取10.0克，置于50毫升大試管內(nèi)，加工0毫升鹽酸，  

    2、將試管放70-80℃水浴中，每隔5-10分鐘以玻璃棒攪拌一次，至樣品消化完全為止，約40-50分鐘。

    3、取出試管，加人10毫升乙醇，混合。冷卻后將混合物移于100毫升具塞量筒中，以25毫升乙醚分次洗試管，一并倒人量筒中。待乙醚全部倒入量筒后，加塞振搖1分鐘，小心開(kāi)塞，放出氣體，再塞好。靜置12分鐘，小心開(kāi)塞，并用石油醚-乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10-20分鐘，待上部液體清晰，吸出上清液于已恒重的錐形瓶?jī)?nèi)，再加5毫升乙醚于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙醚吸出，放入原錐形瓶?jī)?nèi)。將錐形瓶置水浴上蒸干，置95-105℃烘箱中干燥2小時(shí)，取出放入干燥器內(nèi)冷卻0.5小時(shí)后稱(chēng)重。

  計(jì)算： 

X=(m1-m0)/m2     

X：樣品中脂肪的含量％；

m1：接受瓶與脂肪的質(zhì)量，g；

m2：接受瓶的質(zhì)量，g。