阿膠的薄層鑒別與《中國(guó)藥典》權(quán)威性商討

　阿膠系馬科動(dòng)物驢Equus asinus L.的皮，經(jīng)煎煮、濃縮而成的干燥膠塊，味甘、性平、入肺、肝、腎經(jīng)，有滋陰補(bǔ)血、潤(rùn)肺止血、安胎等作用，用于治療血虛萎黃、眩暈心悸、肌萎無(wú)力、心煩不眠、虛風(fēng)內(nèi)動(dòng)、肺燥咳嗽、咯血吐血、尿血便血、崩漏、婦女月經(jīng)不調(diào)、妊娠胎漏等癥。阿膠主含骨原膠，水解后得到蛋白質(zhì)、氨基酸，具有滋陰補(bǔ)血功效。作為常用藥，阿膠自1963年收載于《中華人民共和國(guó)藥典》以來(lái)，至今各版藥典均在收錄中，且質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不斷完善提高，特別是在最新版本《中國(guó)藥典》2005版（Ⅰ部）藥典的標(biāo)準(zhǔn)中，增加了薄層色譜鑒別項(xiàng)，預(yù)示著阿膠的生產(chǎn)正走上標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)展的道路。然而《中國(guó)藥典》2005版（Ⅰ部）130頁(yè)阿膠項(xiàng)下收錄的薄層鑒別方法，在實(shí)際操作中存在一定困難。筆者經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)操作比較，體會(huì)較深�，F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)及結(jié)果報(bào)告如下，供制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)部門(mén)參考，并就阿膠的薄層鑒別方法與有關(guān)權(quán)威部門(mén)商討。 

　　1 器材與方法 

　　1.1 器材阿膠（東阿阿膠）；硅膠（青島海洋化工廠）；甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)品（編號(hào)：7352002 中國(guó)藥品生物制品鑒定所）；化學(xué)試劑均為分析純。 

　　1.2 方法 

　　1.2.1 取阿膠粗粉0.2 g置具塞試管中，加6 mol/L鹽酸溶液8 ml，密塞，置105℃烘箱中加熱6 h，加水6 ml，搖勻，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)�加甲�?0 ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘氨酸對(duì)照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照《中國(guó)藥典》2005版（附錄VI B）薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液2 μl，對(duì)照品溶液1 μl，分別點(diǎn)樣于同一硅膠薄層板上，分別以（藥典方法）苯酚∶硼砂水（4∶1）、（經(jīng)典方法）正丁醇∶冰醋酸∶乙醇∶水（4∶1∶1∶2）作為展開(kāi)劑層析展開(kāi)，取出、晾干，0.2%茚三酮乙醇液噴霧，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。 

　　1.2.2 環(huán)境條件室溫5℃，濕度85%～90%。 

　　2 操作情況對(duì)比 

　　2.1 展開(kāi)劑的配制《中國(guó)藥典》方法：苯酚呈固體狀態(tài)，加熱取用也很不方便，加之硼砂不溶于苯酚中，故該展開(kāi)系統(tǒng)在配制時(shí)就較為困難；經(jīng)典方法：正丁醇、冰醋酸、乙醇、水在4∶1∶1∶2的比例下互溶，即配即用。 

　　2.2 薄層層析展開(kāi)所需時(shí)間《中國(guó)藥典》方法：7.5～8.0 h；經(jīng)典方法：4.0～4.5 h。硅膠板10×20 cm，層析展開(kāi)12 cm。 

　　2.3 層析板晾干所需時(shí)間常溫下，《中國(guó)藥典》方法：70～80 min；經(jīng)典方法：30～40 min；100℃下烘拷：《中國(guó)藥典》方法： 30～40 min；經(jīng)典方法：10～15 min。 

　　2.4 斑點(diǎn)效果0.2%茚三酮乙醇液噴霧，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。兩種不同展開(kāi)劑層析色譜斑點(diǎn)見(jiàn)圖1。 

　　2.5 結(jié)果比較薄層實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，同樣采取80℃下烘烤5 min處理，1與3比較，1層析展開(kāi)后顯色斑點(diǎn)效果極好,3顯色斑點(diǎn)效果較差,有明顯的拖尾現(xiàn)象；未采取加熱處理的2與4比較，層析效果整體較差，而4拖尾現(xiàn)象明顯，2層析效果明顯好于4。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)典方法明顯好于《中國(guó)藥典》2005年（Ⅰ部）收錄的方法。 

　　1~2.展開(kāi)劑：正丁醇∶冰醋酸∶乙醇∶水（4∶1∶1∶2）3~4.展開(kāi)劑：苯酚∶0.5%硼砂（4∶1） 

　　1、3.點(diǎn)樣前、點(diǎn)樣后硅膠板均在80℃下烘烤5 min；2、4.點(diǎn)樣前、點(diǎn)樣后硅膠板未作任何處理 

　　3 討論 

　　阿膠藥用始見(jiàn)于馬王堆漢墓出土的古醫(yī)著“五十二病方”�！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》將其列為上品，以后歷代本草均有論述，明《本草綱目》記載描述最為詳盡。隨著阿膠臨床應(yīng)用研究的深入及應(yīng)用范圍的不斷擴(kuò)大，特別是在社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的今天，人們更注重防治“未病”，阿膠的治療作用和保健作用并重，深受中醫(yī)藥界和人們的信賴。因此，阿膠藥用的需求量一直在不斷地增加。目前，全國(guó)有50多個(gè)阿膠生產(chǎn)廠家，遍及全國(guó)各地山東、河北、河南、北京、吉林、湖南、安徽、黑龍江、甘肅、內(nèi)蒙、等省市。因此，制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)十分必要。而在制定標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，更應(yīng)該注重實(shí)用性和實(shí)效性，為企業(yè)提供方便、快捷有效的方法。按照《中國(guó)藥典》2005年版Ⅰ部收錄的鑒別項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)方法操作，供試品的制備方法可行實(shí)用，茚三酮顯色科學(xué)靈敏，唯展開(kāi)系統(tǒng)苯酚：0.5%硼砂水（4∶1）的可行性和重現(xiàn)性較差，在實(shí)際的操作中有一定困難。試驗(yàn)結(jié)果表明，以苯酚∶0.5%硼砂水（4∶1）作為薄層色譜的展開(kāi)系統(tǒng)，不僅溶劑的配制有困難，層析展開(kāi)所需時(shí)間及晾干時(shí)間長(zhǎng)，費(fèi)時(shí)費(fèi)工，而且斑點(diǎn)擴(kuò)散，無(wú)形沒(méi)狀，多次實(shí)驗(yàn)無(wú)重復(fù)性，層析結(jié)果很不穩(wěn)定。筆者認(rèn)為，藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，作為藥品生產(chǎn)、供應(yīng)和檢驗(yàn)使用的依據(jù)，其方法的選擇，應(yīng)該在專(zhuān)屬的基礎(chǔ)上，盡可能提供方便、實(shí)用、靈敏，可行性和重現(xiàn)性較強(qiáng)的方法。正丁醇∶冰醋酸∶乙醇∶水（4∶1∶1∶2）作為展開(kāi)系統(tǒng)，原本就是氨基酸的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)條件，多少年來(lái)一直沿用于藥學(xué)實(shí)驗(yàn)。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)對(duì)比顯示，經(jīng)典的氨基酸薄層層析展開(kāi)系統(tǒng)，同樣適合阿膠的薄層色譜檢別，以正丁醇∶冰醋酸∶乙醇∶水（4∶1∶1∶2）作為展開(kāi)系統(tǒng)，較之《中國(guó)藥典》阿膠收錄的展開(kāi)系統(tǒng)（苯酚∶硼砂水4∶1）具有配制方便、薄層展開(kāi)時(shí)間較短、晾干較快，省工省時(shí)，而且顯色斑點(diǎn)集中，形狀良好，每次層析實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本相同，具有專(zhuān)屬、方便、實(shí)用、靈敏，重現(xiàn)性良好，具有較強(qiáng)的可行性和實(shí)用性。