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車載式孢子捕捉器對(duì)梨黑斑病孢子的捕捉

來(lái)源: http://www.ktty36.com/  類別:技術(shù)文章  更新時(shí)間:2015-06-30  閱讀

  梨黑斑病是梨種植區(qū)廣泛發(fā)生的一種世界性病害,是梨三大病害之一,該病由梨鏈格孢菌引起。病原菌主要侵染香梨葉片、新梢和果實(shí)。果實(shí)成熟期時(shí)在果實(shí)表面形成近圓形或不規(guī)則的黑褐色病斑,中間凹陷,潮濕時(shí)病斑表面產(chǎn)生黑色霉層,嚴(yán)重影響果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)?稍诨ㄆ诤凸麑(shí)發(fā)育期經(jīng)各種途徑侵入而潛伏至貯藏期發(fā)病,是一種典型的潛伏侵染性病害。庫(kù)爾勒香梨是新疆傳統(tǒng)的特色優(yōu)勢(shì)梨品種,為當(dāng)?shù)亓止a(chǎn)業(yè)帶來(lái)較大的經(jīng)濟(jì)效益。車載式孢子捕捉器對(duì)病菌孢子的捕捉十分有效,對(duì)其進(jìn)行研究有著十分重要的取樣作用。
  
  梨黑斑病菌以分生孢子及菌絲體在病枝梢、病芽、病果上越冬,次年春從病組織上產(chǎn)生新的分生孢子,靠風(fēng)雨傳播。當(dāng)孢子萌發(fā)后,通過(guò)梨樹(shù)皮孔、氣孔侵入或直接穿透寄主表皮侵入,引起初次侵染。然后在梨樹(shù)整個(gè)生育期可多次產(chǎn)生新孢子進(jìn)行侵染危害,形成重復(fù)侵染。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)該病在果園空氣中的分生孢子傳播及其發(fā)病規(guī)律和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)尚無(wú)研究。
  
  將涂有凡士林的載玻片分別置于兩個(gè)香梨果園的車載式孢子捕捉器中,每周采樣2次,分別做好玻片編號(hào)和記錄,帶回實(shí)驗(yàn)室,于生物顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)及記錄。從花序伸出期至落花期,在供試果園中的孢子捕捉器周圍選8棵樹(shù)作為觀測(cè)點(diǎn),每周采集兩次梨花,每次隨機(jī)采集梨花25朵并作編號(hào)記錄。取其中15朵花進(jìn)行分離培養(yǎng),無(wú)菌操作下用0.25%次氯酸鈉表面消毒45s,無(wú)菌水清洗3次,置于滅菌PCA培養(yǎng)基平皿中,25℃培養(yǎng)5~7d,純化長(zhǎng)出的目標(biāo)菌落,鏡檢觀察及鑒定。用DNA提取試劑盒提取另10朵花的DNA,加50μL無(wú)菌水洗脫2次。用核酸蛋白分析儀檢測(cè)樣品DNA的純度和濃度,并進(jìn)行PCR鑒定。
  
  通過(guò)車載式孢子捕捉器在出口果園不同時(shí)期捕捉香梨黑斑病菌孢子并且對(duì)花和果實(shí)中的該病菌進(jìn)行檢測(cè)并監(jiān)測(cè),查明了該病菌孢子在果園的消長(zhǎng)過(guò)程。明確了病害發(fā)生期和發(fā)病嚴(yán)重度與果園孢子量和氣象因素等之間的關(guān)系,為香梨黑斑病的果園防治提供依據(jù)。

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