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通過桑果組培研究植物組培技術(shù)

來源：　類別：技術(shù)文章　更新時(shí)間：2013-01-19　閱讀次

　　桑樹是多年生木本植物，屬于落葉樹種，主要分布于溫帶和亞熱帶地區(qū)。我國(guó)果桑主要分布在江蘇、廣東、廣西、湖北、陜西等地。但規(guī)模都不大，一般每個(gè)種植地不超過33 hm²畝�，F(xiàn)有果桑品種十幾個(gè)。從遺傳方面來講，有二倍體（2n）、三倍體（3n）、四倍體（4n）。產(chǎn)量2 250 kg/ hm² , 7 500~11 250 kg/ hm²、30 000 kg/ hm²。桑苗繁殖的方法很多，大體上分為有性繁殖和無(wú)性繁殖兩大類。
　　嫁接法、扦插法，一是速度慢，二是質(zhì)量差，不能脫毒，且易感病毒病。近20余年，隨著生物技術(shù)的不斷完善和提高，利用組織培養(yǎng)快速繁殖并產(chǎn)生大量脫毒苗，以解決某些植物的退化，提高果實(shí)產(chǎn)量和質(zhì)量，應(yīng)用于生產(chǎn)，為加速培養(yǎng)桑樹優(yōu)良品種開辟出新途徑。果桑不但桑果產(chǎn)量高、而且桑葉的質(zhì)量、產(chǎn)量與湖桑（普通養(yǎng)蠶用桑樹）相當(dāng)。因此既可發(fā)展養(yǎng)蠶業(yè)，又可收獲桑果。鮮桑果可以直接供應(yīng)市場(chǎng)，也可加工成桑果汁、桑果醬、釀成桑果酒，制成桑仁糕，還可以提煉食用色素、醫(yī)用黃酮等醫(yī)藥產(chǎn)品。香港雜志把果桑稱謂第三代流行果品之一。
　　1 材料和方法
　　1. 1 材料的選擇和處理
　　取健壯枝條的頂芽或側(cè)芽，剪除葉片，用無(wú)菌水擦洗干凈，在無(wú)菌條件下，用0.1%的升汞溶液浸泡消毒10min，無(wú)菌水沖洗3~4次，將處理過的組織放入組培培養(yǎng)室中開始培養(yǎng)。
　　1.2 接種
　　在無(wú)菌條件下，將頂芽或側(cè)芽切成3~5mm長(zhǎng)的段，剝?nèi)デo尖外部鱗片和小葉，接種到培養(yǎng)基上，每瓶接5~7段。
　　1. 3 培養(yǎng)
　　將頂芽或莖段，接種在MS + 0.5mg/L BA + 0. lmg/L NAA + 0. lmg/L GA培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加3%蔗糖，用0.5%瓊脂固化。在溫度25℃左右和光照下，5d后長(zhǎng)出單生芽，4周后小芽長(zhǎng)到1 cm并產(chǎn)生叢生苗。
　　將叢生苗分割接種在MS + 2mg/L BA + 0.5mg/L GA培養(yǎng)基中，附加蔗糖3% ,0.5%瓊脂固化。
　　經(jīng)培養(yǎng)小苗長(zhǎng)到3~5cm高時(shí)，可以從節(jié)間處，將其切成小段進(jìn)行繼代培養(yǎng)，側(cè)芽萌動(dòng)，迅速生長(zhǎng)。1個(gè)月可長(zhǎng)到3~5cm高，繼代培養(yǎng)可使側(cè)芽苗不斷增殖，從而獲得大量可供繁殖的試管苗。
　　切下帶頂芽的苗，插在1/2MS+1mg/L GA + 2%蔗糖的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。約4、5周后，在自然光照下，生根發(fā)育成完整植株，供移栽。
　　3 結(jié)果與討論
　　本材料為雙子葉植物，在培養(yǎng)過程中，我們發(fā)現(xiàn)在莖段的切口特別是基部切口上會(huì)長(zhǎng)出類似愈傷組織的褐化物，且不斷膨大，直至將底部包圍。這樣從頂芽開始逐漸枯黃、萎縮，造成培養(yǎng)失效。因此，建議在培養(yǎng)基中加入適量的活性炭等吸收劑吸附部分褐化物質(zhì)，也可用頻繁轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上或用切除褐化組織的方法加以防止，有一定效果。

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