淀粉酶法與鹽酸水解旋光法的比較

淀粉酶法與鹽酸水解旋光法的比較

淀粉是由結(jié)構(gòu)不同的直鏈淀粉和支鏈淀粉組成的高分子碳水化合物，它是人體能量和營養(yǎng)物質(zhì)的主要來源。其中有專門的直鏈淀粉測定儀，用于測定直鏈淀粉含量。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，玉米深加工生產(chǎn)出的玉米淀粉已被廣泛應(yīng)用于食品、藥品和輕工業(yè)的生產(chǎn)原料。因而，如何快速準確地測定玉米中淀粉的含量，提高其經(jīng)濟價值和食用品質(zhì)，對合理使用玉米及其副產(chǎn)品、選育良種、科學(xué)儲糧具有十分重要的意義。

淀粉酶法與鹽酸水解旋光法的比較：

原理：前者為試樣經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中α-淀粉經(jīng)淀粉酶水解成雙糖，雙糖再用鹽酸水解成具有還原性的單糖，最后按還原糖測定，并折算成淀粉。后者為淀粉在在稀稀鹽酸的作用下水解，然后用旋光儀測定水解液的旋光度，求出淀粉含量。

檢驗方法：前者為稱取2.00g~5.00g（過40目）試樣置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，先用50ml乙醚分五次洗滌去除脂肪，再用約100ml乙醚洗滌除去可溶性糖類，將殘留物移入250ml燒杯內(nèi)并用50ml水洗滌濾紙和漏斗，洗液并入燒杯內(nèi)。將燒杯置沸水浴中加熱15min,使淀粉糊化，然后放置冷卻至60℃以下，加20mlα-淀粉酶溶液，在恒溫水浴鍋中55℃~60℃保溫水解1h，并經(jīng)常攪拌。取酶解液1滴加1滴碘溶液應(yīng)不顯藍色，若顯藍色，再加熱糊化并加20mlα-淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍色為止。加熱至沸騰，冷卻后移入250ml容量瓶中并加水定容至刻度，混均、過濾。棄去初濾液。取50ml濾液，置于250ml錐形瓶中，加5ml鹽酸，裝上回流冷凝管，在沸水浴中回流1h。冷卻后加2滴甲基紅指示液，用氫氧化鈉溶液中和至中性，溶液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，洗滌錐形瓶，洗液并入100ml容量瓶，加水定容至刻度，混均備用。用處理好的試樣按GB/T5009.7操作，測定還原糖含量，同時量取50ml水及與試樣處理時相同量的。后者為稱取5.00g（過40目）的試樣于250ml錐形瓶加25ml1%鹽酸溶液混合均勻，再加入25ml1%鹽酸溶液，并浸入到沸騰的水浴中15min（不停地攪拌3~5min），水解完成后加入30ml溫水，將錐形瓶置于冷水浴中冷卻，然后加入5.0ml10%磷鎢酸溶液，并轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，用水洗滌錐形瓶一并轉(zhuǎn)入容量瓶中，用水稀釋至刻度，靜止后過濾（棄去初液10~15ml）。

測定過程：前者為α-淀粉酶溶液，按同樣方法作試劑空白試驗。后者為取濾液注入長為1分米或2分分米米的的旋旋光光管管中，測定其旋光度。按同樣方法作試劑空白試驗。

測定時間:前者為①樣品經(jīng)除去脂肪和可溶性糖后糊化15min。②加淀粉酶水解1h，直至酶解完全為止。③加酸繼續(xù)冷凝回流1h。后者為加鹽酸水解15min。

另外，測定淀粉含量，還有相應(yīng)的儀器，如直鏈淀粉分析儀，它能夠測定大米、玉米、小麥等農(nóng)作物中淀粉含量。