飼料中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的測定

      采用范氏（Van Soest）的洗滌纖維分析法測定中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維原理:植物性飼料經(jīng)中性洗滌劑煮沸處理，不溶解的殘渣為中性洗滌纖維，主要為細胞壁成分，其中包括半纖維素、纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。中性洗滌纖維經(jīng)酸性洗滌劑處理，剩余的殘渣為酸性洗滌纖維，其中包括纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。酸性洗滌纖維經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣為木質(zhì)素和硅酸鹽，從酸性洗滌纖維值中減去72%硫酸處理后的殘渣為飼料的纖維素含量。將72%硫酸處理后的殘渣灰化，在灰化過程中逸出的部分為酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）的含量。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，或者是食品界，尤其是快速測定時，我們通常不選擇實驗室方法來測定，而是選擇快速測定法，即直接用儀器如纖維測定儀。纖維測定儀利用酸堿消煮法來進行測定，有時又叫做粗纖維測定儀，因為測定的物質(zhì)中不僅含有纖維，還含有木質(zhì)素等其他物質(zhì)，因此被稱為粗纖維。

      試劑的配制：中性洗滌劑（3%十二烷基硫酸鈉）：準確稱取18.6g乙二胺四乙酸二鈉（EDTA，C10H14O8Na22H2O，分析純）和6.8g硼酸鈉（Na2B4O7?10H2O，分析純）放入燒杯中，加入少量蒸餾水，加熱溶解后，再加入30g十二烷基硫酸鈉（C12H25NaO4S，分析純）和10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析純）；再稱取4.56g無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4，分析純）置于另一燒杯中，加入少量蒸餾水微微加熱溶解后，倒入前一個燒杯中，在容量瓶中稀釋至1000ml，其中pH值約為6.9~7.1（pH值一般勿需調(diào)整）；1N硫酸：量取約27.87ml濃硫酸（分析純，比重1.84，98%），徐徐加入已裝有500ml蒸餾水的燒杯中，冷卻后注入1000ml容量瓶定容，標定；酸性洗滌劑（2%十六烷三甲基溴化銨）：稱取20g十六烷三甲基溴化銨（CTAB，分析純）溶于1000ml1N硫酸，必要時過濾。

      操作步驟：中性洗滌纖維測定.準確稱取1.0000g樣品（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100ml中性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉。將燒杯套上冷凝裝置于電爐上，在5~10min內(nèi)煮沸，并持續(xù)保持微沸60min。煮沸完畢后，取下直筒燒杯，將燒杯中溶液倒入安裝在抽濾瓶上的已知重量的玻璃坩堝中進行過濾，將燒杯中的殘渣全部移入，并用沸水沖洗玻璃坩堝與殘渣，直洗至濾液呈中性為止。用20ml丙酮沖洗二次，抽濾。將玻璃坩堝置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷卻30min稱重，直稱至恒重。酸性洗滌纖維測定。準確稱取1g樣品（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100ml酸性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘。將燒杯套上冷凝裝置于電爐上，在5~10min內(nèi)煮沸，并持續(xù)保持微沸60min。趁熱用已知重量的玻璃坩堝抽濾，并用沸水反復(fù)沖洗玻璃坩堝及殘渣至濾液呈中性為止。用少量丙酮沖洗殘渣至抽下的丙酮液呈無色為止，并抽凈丙酮。將玻璃坩堝置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷卻30 min稱重，直稱至恒重。酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分（AIA）測定：將酸性洗滌纖維加入72%硫酸，在20℃消化3h后過濾，并沖洗至中性。消化過程中溶解部分為纖維素，不溶解的殘渣為酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分，將殘渣烘干并灼燒灰化后即可得出酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分的含量。

      結(jié)果計算：中性洗滌纖維含量的計算：NDF（%）=（W1－W2）/W×100;式中：W1—玻璃坩堝和NDF重（g）；W2—玻璃坩堝重（g）；W—試樣重（g）；酸性洗滌纖維含量的計算：ADF（%）=（G1－G2）/G×100；式中：G1—玻璃坩堝和ADF重（g）；G2—玻璃坩堝重（g）；W—試樣重（g）。半纖維素含量的計算：半纖維素（%）=NDF（%）－ADF（%）；纖維素含量的計算：纖維素=ADF（%）－經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣（%）；酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）含量的計算：ADL（%）=殘渣（%）－灰分（硅酸鹽，%）。