作物氮素診斷技術(shù)的研究綜述

氮素是對(duì)作物生長(zhǎng)發(fā)育、產(chǎn)量品質(zhì)形成影響最為顯著的營(yíng)養(yǎng)元素。作物體內(nèi)的全氮含量約為干重的0.3%-5.0%氮素參與葉綠素的組成，不僅是蛋白質(zhì)的主要組成成分，也是核酸和植物體內(nèi)許多酶的重要組成成分。此外，植物體內(nèi)一些維生素、某些生物堿以及部分植物激素如生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素均含有氮素。在生產(chǎn)中，缺氮時(shí)，作物地上部和根系生長(zhǎng)都顯著受到抑制繁殖器官的形成和發(fā)育也受到限制，植株提前成熟，種子和果實(shí)小而不充實(shí)，顯著影響作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。相反地，增施氮肥可以提高作物產(chǎn)量和改善作物產(chǎn)品品質(zhì)，因此氮肥投入量逐年增加。隨著氮肥施用的大量增加，氮肥利用效率逐漸降低，就平均值而言，麥類作物對(duì)幾種氮肥的利用率為27%～34%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于玉米、棉花、水稻等作物制。由于氮肥施用不科學(xué)，氮素常以淋失、反硝化脫氮及氮素?fù)]發(fā)等方式損失，麥類作物上損失率在14%～55%之間，秋熟作物損失率在18%～53%。損失的氮素大部分進(jìn)入地下水和地表水，造成地下水和地表水中硝態(tài)氮不斷增加，從而引起水體富營(yíng)養(yǎng)化，造成一系列環(huán)境問題如水資源和水產(chǎn)資源遭到破壞，水的使用價(jià)值降低，水處理的成本提高，甚至?xí)�威脅人類健康。因此，了解和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)作物氮素狀況，并據(jù)此確定科學(xué)的施肥管理措施，對(duì)提高氮素利用效率，合理利用資源，提高作物產(chǎn)量、改善品質(zhì)以及保護(hù)環(huán)境都有重要意義。

　作物氮素營(yíng)養(yǎng)診斷的研究起始于19世紀(jì)，到20世紀(jì)50年代，癥狀診斷和化學(xué)診斷在理論和方法上已奠定了一定的基礎(chǔ)。隨后50年來(lái)在應(yīng)用范圍、對(duì)象、容及技術(shù)方法均有了很大進(jìn)步。作物氮素營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)的監(jiān)測(cè)與診斷是作物栽培調(diào)控和生產(chǎn)管理的核心內(nèi)容，是農(nóng)業(yè)技術(shù)指導(dǎo)部門和生產(chǎn)者制定管理決策的主要依據(jù)，還為精準(zhǔn)農(nóng)業(yè)的現(xiàn)代化管理提供必需的基礎(chǔ)信息。因此，基于氮素營(yíng)養(yǎng)狀況的作物生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)和診斷一直是農(nóng)學(xué)領(lǐng)域中的核心研究?jī)?nèi)容之一。

1 作物氨素營(yíng)養(yǎng)診斷的傳統(tǒng)方法

1.1 作物缺肥外觀診斷

(1)癥狀診斷根據(jù)作物表現(xiàn)出的某種特定癥狀，從而確定其可能缺乏某種元素，癥狀診斷在很多營(yíng)養(yǎng)元素的診斷上已得到廣泛應(yīng)用。缺氮時(shí)，作物地上部和根系生長(zhǎng)都顯著受到抑制，葉片細(xì)小直立，與莖的夾角小，時(shí)色淡綠，嚴(yán)重時(shí)呈淡黃色。植株莖稈細(xì)而長(zhǎng)，很少有分蘗或分枝，同時(shí)繁殖器官的形成和發(fā)育也受到限制，花和果實(shí)稀少，植株提前成熟。種子和果實(shí)小而不充實(shí)，顯著影響作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。氮素過(guò)多的癥狀為植株徒長(zhǎng)，節(jié)間長(zhǎng)，分蘗多，葉色嫩綠，貪青晚熟。這種氮素診斷的方法通常只在植株僅缺一種元素的狀況下有效，在植株同時(shí)缺乏兩種或兩種以上營(yíng)養(yǎng)元素，或出現(xiàn)非營(yíng)養(yǎng)元素(病蟲害、藥害、生理病害)而引起的癥狀時(shí)，易于混淆，造成誤診。再者，當(dāng)植株出現(xiàn)某種癥狀時(shí)，表明缺氨狀況已經(jīng)相當(dāng)嚴(yán)重，此時(shí)在采取補(bǔ)救措施為時(shí)已晚。因此，癥狀診斷在實(shí)際應(yīng)用中存在明顯的局限性，尤其是準(zhǔn)確性和時(shí)效性有待提高。

(2)長(zhǎng)勢(shì)診斷中國(guó)人民在長(zhǎng)期生產(chǎn)實(shí)踐中，早就總結(jié)出許多依據(jù)作物形態(tài)特征診斷其生長(zhǎng)發(fā)育的方法，即看苗診斷。狹義的長(zhǎng)勢(shì)即作物生長(zhǎng)的速度，如分蘗發(fā)生的遲早和多少，出葉的快慢，葉片的長(zhǎng)短和葉面積的大小，發(fā)根能力的強(qiáng)弱和數(shù)量的多少等。20世紀(jì)60年代后，這種診斷方法在中國(guó)受到廣泛重視，并在總結(jié)農(nóng)民豐產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上得到發(fā)展和充實(shí)。其主要指標(biāo)有分蘗消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)和葉面積指數(shù)。例如，河南農(nóng)民總結(jié)出小麥苗期的葉片長(zhǎng)相為：瘦弱苗象馬耳朵，壯苗象騾耳朵，旺苗象豬耳朵。最近，楊邦杰對(duì)長(zhǎng)勢(shì)的內(nèi)涵加以擴(kuò)充，囊括了傳統(tǒng)看苗診斷所有的指標(biāo)，把長(zhǎng)勢(shì)定義為作物生長(zhǎng)的狀況與趨勢(shì)。作物的長(zhǎng)勢(shì)可以用個(gè)體與群體特征來(lái)描述，禾谷類作物的個(gè)體特征可以用莖、葉、根與穗的特征描述，如株高，分蘗數(shù)，葉的數(shù)量、形狀、顏色，根的發(fā)育情況等。群體特征可用群體密度、葉面積指數(shù)、布局與動(dòng)態(tài)來(lái)描述，只有發(fā)育健壯的個(gè)體所構(gòu)成的合理群體，才能是長(zhǎng)勢(shì)良好。根據(jù)植株長(zhǎng)勢(shì)長(zhǎng)相和特定葉位間的節(jié)間長(zhǎng)度，可以診斷不同生育時(shí)期氮素營(yíng)養(yǎng)豐缺狀況，如水稻缺氮時(shí)，葉片與主莖間的夾角小于450，葉片自立，植株矮小，小麥缺氮時(shí)分蘗發(fā)生慢且缺位，次生根少。這種方法在一定程度上可以有限地判斷植株的氮素營(yíng)養(yǎng)狀況，但由于隨著頻繁的品種更新?lián)Q代，其外觀長(zhǎng)勢(shì)長(zhǎng)相發(fā)生變化，因而在生產(chǎn)應(yīng)用上受到限制。

　(3)葉色診斷中國(guó)農(nóng)民素有看作物葉色施追肥的傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)，從300多年前的“沈氏農(nóng)書”關(guān)于對(duì)水稻進(jìn)行葉色診斷追施孕穗肥到現(xiàn)在，葉色診斷氮營(yíng)養(yǎng)的方法已逐漸發(fā)展成熟。20世紀(jì)50年代，全國(guó)勞模陳永康總結(jié)了水稻群體葉色的“三黑三黃”變化，以控制晚稻生長(zhǎng)發(fā)育，達(dá)到高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的經(jīng)驗(yàn)，提出了“肥田黃透再施，瘦田見黃既施，一般田不黃不施”的水稻追肥原則。人們對(duì)看苗施肥的方法進(jìn)行了大量研究和總結(jié)但是這種方法缺乏定量葉色深淺的客觀標(biāo)準(zhǔn)，很難推廣應(yīng)用。有研究者用比色卡目力比色測(cè)定水稻葉色級(jí)，對(duì)單季晚稻黃黑變化的生理基礎(chǔ)作了一系列研究，并提出了相應(yīng)的判斷指標(biāo)。20世紀(jì)70～80年代，日本農(nóng)學(xué)家和中國(guó)學(xué)者先后研制出了葉色票和葉色卡，建立了葉色等級(jí)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，但是測(cè)定方法仍沿用目測(cè)，葉色等級(jí)評(píng)判受人的主觀意識(shí)影響較大。葉色是植株體內(nèi)氮素養(yǎng)分的外在表現(xiàn)，用葉色卡判定的葉色級(jí)可以粗略作為氮素營(yíng)養(yǎng)水平高低的指標(biāo)。他們根據(jù)不同品種類型確定標(biāo)準(zhǔn)葉級(jí)范圍，當(dāng)田間葉色級(jí)超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)葉色級(jí)，說(shuō)明氮素過(guò)剩，應(yīng)采取措施加以控制；當(dāng)葉色級(jí)小于標(biāo)準(zhǔn)葉色級(jí)水平，則表明氮素營(yíng)養(yǎng)不良，應(yīng)追施適量氮肥。葉色診斷是氮素營(yíng)養(yǎng)診斷中簡(jiǎn)單易行的方法，如標(biāo)準(zhǔn)葉色級(jí)確定合適，診斷會(huì)取得良好的效果。總體來(lái)說(shuō)，葉色卡法簡(jiǎn)單、方便，營(yíng)養(yǎng)診斷半定量化，但是不能區(qū)分作物失綠是由于缺氮引起的還是由于其它因素引起的。該法還受到品種、植被密度以及土壤氮素狀況和葉綠素含量變化等因子的影響。另外人們對(duì)顏色的視知覺在不同的個(gè)體之間存在差異，這些都制約著葉色卡法診斷水稻氮素營(yíng)養(yǎng)的應(yīng)用和精度。

1.2 作物缺肥化學(xué)診斷

(1)植株全氮診斷 在作物化學(xué)診斷分析工作中植株全氮診斷研究的最早、最充分，大多數(shù)作物不同生育期和不同部位器官的氮臨界濃度已基本清楚。植株全氮含量可以很好地反映作物氮素營(yíng)養(yǎng)狀況，與作物產(chǎn)量也有很好的相關(guān)性，且全氮含量相對(duì)比較穩(wěn)定，是一個(gè)很好的診斷指標(biāo)。傳統(tǒng)的全氮營(yíng)養(yǎng)診斷方法主要是基于植物組織的實(shí)驗(yàn)室化學(xué)分析。主要的實(shí)驗(yàn)室化學(xué)分析方法有杜馬氏方法，該法的主要儀器是全自動(dòng)定氮儀。杜馬氏方法是將樣本充分燃燒，植物所有形態(tài)的氮均轉(zhuǎn)化為氮?dú)?N2），通過(guò)計(jì)算氮?dú)獾捏w積來(lái)計(jì)算樣本的全氮量。該方法的主要缺點(diǎn)是儀器太貴，不能普及。另外一種常用的方法是凱氏法，即濃硫酸和混合加速劑或氧化劑消煮植株樣本，將有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為銨態(tài)氮后用蒸餾滴定法測(cè)定。無(wú)論是杜馬氏方法還是凱氏法均為試驗(yàn)室內(nèi)化學(xué)分析方法，這些分析方法普遍要求破壞植被樣本。從采集大量的樣本、烘干、稱重、研磨直到使用有潛在危害性藥品進(jìn)行測(cè)試，需耗費(fèi)大量的時(shí)間、人力和物力。由于花費(fèi)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，以至于結(jié)果的適時(shí)性不強(qiáng)，而且試驗(yàn)室化學(xué)分析需要有經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)分析人員和大量的分析試劑與設(shè)備，因而在生產(chǎn)中難以實(shí)現(xiàn)快速規(guī)�；�的推廣應(yīng)用。

(2)硝酸鹽快速診斷由于硝態(tài)氮作為非代謝物質(zhì)，以一種半儲(chǔ)備狀態(tài)存在于植物體內(nèi)，當(dāng)作物有輕微缺氮時(shí)，硝態(tài)氮庫(kù)的需求迅速增加，此時(shí)，全氮庫(kù)還沒有明顯變化，而硝態(tài)氮庫(kù)已發(fā)生明顯變化。若供氮超過(guò)作物需求時(shí)，硝態(tài)氮也比全氮有較大幅度的增加。植物組織中硝態(tài)氮含量的相對(duì)變化要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于全氮，它能靈敏地反映作物對(duì)氮的需求，因此可以用硝態(tài)氮代替全氨作為氮素營(yíng)養(yǎng)診斷指標(biāo)來(lái)估計(jì)植株氮素營(yíng)養(yǎng)狀況和進(jìn)行追肥推薦。許多研究表明，硝態(tài)氮預(yù)測(cè)小麥氮缺乏較為可靠，但臨界值在地點(diǎn)間的變異很大，受植物基因型、土壤等影響，且隨時(shí)間變化迅速，因此在實(shí)際應(yīng)用中存在著一定的局限性。目前，以硝態(tài)氮(硝酸鹽)作為診斷植株氮素營(yíng)養(yǎng)豐缺狀況在旱地作物和蔬菜上應(yīng)用的較多。一般認(rèn)為，小麥以莖基部作為診斷部位較合適，該部位作為一個(gè)輸導(dǎo)和貯藏組織，植物體內(nèi)剩余的硝態(tài)氮大多累積于此，而且其目變化相對(duì)較小。玉米一般采用新成熟葉的葉脈作為診斷部位。呂世華等經(jīng)過(guò)田間試驗(yàn)證實(shí)，小麥拔節(jié)期莖基部NO3-N的二苯胺速測(cè)法可以快速準(zhǔn)確診斷氮素營(yíng)養(yǎng)狀況，在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用是可行的。曹洪生等研究出小麥NND快速診斷法，就是利用小麥葉鞘液中硝態(tài)氮含量來(lái)指導(dǎo)拔節(jié)肥。張學(xué)軍等也將拔節(jié)期作為氮營(yíng)養(yǎng)診斷時(shí)期，通過(guò)反射儀測(cè)定莖基部硝酸鹽含量，同時(shí)由植株硝酸鹽和土壤表層Nmin(土壤剖面無(wú)機(jī)氮測(cè)試)聯(lián)合診斷，建立了追肥推薦施肥模型∞。以上兩種硝態(tài)氮測(cè)定方法具有快速、準(zhǔn)確和簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)，適合田間條件下氮素診斷，但二苯胺法適用含氨水平不很高的植株，發(fā)射儀法費(fèi)用較高，其應(yīng)用受到一定限制。

　(3)硝酸還原酶法由于硝酸還原酶(NRA)代表了氮素同化水平，而NO3-僅代表體內(nèi)氮素累積水平，因艮此NRA作為營(yíng)養(yǎng)診斷指標(biāo)更優(yōu)于NO3-濃度。洪劍明等研究發(fā)現(xiàn)，在一定施肥水平范圍內(nèi)，小麥主要功能葉片的NRA水平隨土壤中NO3-，濃度升高而升高，NRA為一種敏感的適應(yīng)酶，它能很好地反映土壤中氮素狀況。馬鳳鳴等以甜菜為材料發(fā)現(xiàn)，在生育中前期NRA隨施氮量增加而提高，加快NO3-還原，但后期以糖代謝為主，NO3-與NRA相關(guān)性不顯著，篩選出對(duì)氮素反應(yīng)的臨界期作為診斷氮素豐缺的適宜時(shí)期，進(jìn)而給出各期的NRA的理論值。但由于NRA對(duì)內(nèi)外條件變化反應(yīng)十分敏感，在具體操作中要在嚴(yán)格控制的條件下進(jìn)行，注意NO3-，濃度、光照、持續(xù)高溫和水分脅迫等對(duì)NRA水平的影響。

(4)氨基態(tài)氮診斷有研究表明，在一定施氮范圍內(nèi)，施氮量與棉花的蕾花鈴期功能葉片的全氮和葉柄基部硝態(tài)氮含量顯著相關(guān)，當(dāng)葉片的全氮和葉柄基部硝態(tài)氮含量高時(shí)，氨基態(tài)氮亦高，反之亦然，且氨基氮與葉片的全氮呈顯著正相關(guān)。據(jù)此認(rèn)為，氨基氮可作為棉花氮營(yíng)養(yǎng)的診斷指標(biāo)，并給出初步診斷值。袁玲等認(rèn)為，水稻功能葉片游離氨基酸含量高峰期出現(xiàn)在分蘗期，拔節(jié)期降至1/2，抽穗期降為1/3，其規(guī)律與土壤中銨態(tài)氮變化相似，也與植株氮含量變化相似，所以建議將游離氨基態(tài)氮(FA-N)作為氮營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)。張衛(wèi)建等發(fā)現(xiàn)，水稻倒3葉鞘的游離氨基態(tài)氮隨氮用量的增加而上升，且各器官以倒3葉鞘的差異最為明顯，以倒3葉鞘的FA-N含量變化可對(duì)氮營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行快速診斷，指導(dǎo)水稻中后期定量施肥。

2 作物氮素營(yíng)養(yǎng)診斷的現(xiàn)代技術(shù)

2.1 葉綠素儀分析技術(shù)

　　當(dāng)作物在缺氮時(shí)一般會(huì)表現(xiàn)出一些明顯的缺素癥狀，如葉片葉綠素含量降低導(dǎo)致的葉色變淺，而氮素過(guò)多，葉色顏色變深。植物的葉片葉綠素含量與葉片含氮量密切相關(guān)，并且葉片含氮量和葉綠素變化趨勢(shì)相似，故可通過(guò)葉片顏色的變化就可以了解作物的氮素營(yíng)養(yǎng)狀況。研究發(fā)現(xiàn)，作物葉片光反射特性與葉色深淺存在定量關(guān)系，植物在可見光波段的反射率主要受葉綠素的影響，且550nm、675nm附近的反射率對(duì)葉綠素含量比較敏感，但單一波段的反射率易受生物量、背景等的影響，所以用兩波段的比值可以提高葉綠素光譜診斷的精度。根據(jù)此原理日本的MINOLTA公司在20世紀(jì)80年代推出SPAD-501、SPAD-502葉綠素儀，來(lái)進(jìn)行田間的作物氮素診斷及指導(dǎo)施肥，并在某些作物的診斷中取得了較好的效果。目前在葉綠素儀的應(yīng)用研究中，所采用的測(cè)定部位大體相同，即作物生長(zhǎng)前期取新展開的第一張葉片作為測(cè)定部位，生長(zhǎng)中后期則取功能葉作為測(cè)定部位。葉綠素儀在個(gè)體之間的測(cè)定值存在差異，在同一張葉片的不同部位的測(cè)定值也不相同，一般認(rèn)為距離葉基部55%處的SPAD測(cè)定值較大且偏差較小，是合適的測(cè)試部位點(diǎn)。由此可見，葉綠素儀可以在一定程度上表征作物的氮素營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，但其在實(shí)際應(yīng)用中往往受作物的品種、生育期、生長(zhǎng)環(huán)境等的影響，要精確地估測(cè)氮素營(yíng)養(yǎng)水平，還需建立校正曲線或改進(jìn)計(jì)算方法。王紹華等基于頂4葉對(duì)氮反映敏感、頂3葉鈍感的原理，利用SPAD提出了相對(duì)葉色差(RSPAD)的概念，初步建立了葉片(植株)含氮率的RSPAD診斷模型該模型僅與水稻亞種類型有關(guān)，可以不受具體品種和生育進(jìn)程的影響，具有較好的普適性，但還有待于更多生態(tài)點(diǎn)、更多品種和更大面積的驗(yàn)證。張憲等基于小麥的頂3葉SPAD值在不同氮素處理間變化幅度大，將其作為氮素營(yíng)養(yǎng)診斷的指示葉片，并依據(jù)作物產(chǎn)量與養(yǎng)分濃度理論，具體提出了拔節(jié)期和孕穗期的適宜及臨界SPAD值，這種方法簡(jiǎn)便、時(shí)效性強(qiáng)，尚需多年多點(diǎn)、更多品種的試驗(yàn)進(jìn)一步修證，以便建立普適性的模型用于指導(dǎo)生產(chǎn)。另外，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室分析配合使用一些校正參數(shù)(如葉干重、葉面積等)，可以調(diào)節(jié)葉綠素計(jì)值與氮素營(yíng)養(yǎng)之間的相關(guān)性，但這樣就弱化了葉綠素計(jì)快速、簡(jiǎn)便和不損傷植被生長(zhǎng)等特點(diǎn)，失去了它的本來(lái)意義，并且所有的相關(guān)分析或者回歸分析得到的模型均受到品種和生育期和環(huán)境條件等限制，因此這種方法還不是一個(gè)快速可靠的非破壞性方法。

2.2 葉綠素?zé)晒夥治黾夹g(shù)

葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)技術(shù)在測(cè)定葉片光合作用過(guò)程中光系統(tǒng)對(duì)光能的吸收、傳遞、耗散、分配等方面具有獨(dú)特的作用，與“表觀性”的氣體交換指標(biāo)相比，葉綠素?zé)晒鈪��?shù)更具有反映“內(nèi)在性”特點(diǎn)，因此，葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)技術(shù)被稱為測(cè)定葉片光合功能快速、無(wú)損傷的探針。近年來(lái)關(guān)于葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)技術(shù)一系列的研究進(jìn)一步證明了利用體內(nèi)葉綠素?zé)晒鉃樘烊惶结槪瑏?lái)研究和探測(cè)植物光合生理狀態(tài)及各種外界因子對(duì)其影響是可行的，使它在植物各種抗性生理、高產(chǎn)生理、作物育種栽培、植物生態(tài)、甚至植物遙感遙測(cè)等不同植物學(xué)分支和農(nóng)學(xué)中得到不同程度的應(yīng)用。隨著研究的不斷深入，愈來(lái)愈多的工作表明，植物體內(nèi)發(fā)出的葉綠素?zé)晒庑盘?hào)包含十分豐富的生物信息，極易隨外界環(huán)境條件而發(fā)生變化，可以作為快速、靈敏和無(wú)損傷地研究和探測(cè)多種逆境因子對(duì)植物光合作用的理想方法。由于它具有快速、靈敏和非破壞性測(cè)量等優(yōu)點(diǎn)，使它比現(xiàn)行的其它檢測(cè)方法更優(yōu)越、更準(zhǔn)確。

有研究指出，受到氮素脅迫小麥幼苗的光化學(xué)效率Fv/Fm和φ~PSII比正常供氨水平明顯下降。沙田柚葉葉綠素?zé)晒鈪��?shù)光化學(xué)效率與葉片氮含量呈極顯著正相關(guān)；范燕萍等采用水培的方法研究匙葉天南星光合特性時(shí)發(fā)現(xiàn)，葉片葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動(dòng)力學(xué)參數(shù)可以作為植物對(duì)氮素營(yíng)養(yǎng)環(huán)境適宜度的靈敏指標(biāo)。郭延平等測(cè)得缺磷條件下溫州蜜柑葉片的最大熒光Fm、PSII光化學(xué)效率(Fv/Fm)及表觀電子傳遞速率（ETR）明顯低于供磷植株。李紹長(zhǎng)等試驗(yàn)表明低磷處理使玉米葉片PSH關(guān)閉程度增加、光能轉(zhuǎn)換和電子傳遞效率降低，過(guò)剩激發(fā)能增加。分析顯示，葉片磷含量與Fv/Fm的關(guān)系高度符合指數(shù)函數(shù)關(guān)系。具體表現(xiàn)為葉片磷含量低于0.1mg/gFW時(shí)，F(xiàn)v/Fm將隨磷含量減少而迅速降低，而葉片磷含量高于0.1mg/gFW時(shí)，F(xiàn)v/Fm將逐漸趨于穩(wěn)定，過(guò)高的葉片磷含量并不會(huì)提高葉片的光化學(xué)效率，因此含磷量0.1mg/gFW時(shí)Fv/Fm的閩值。馬吉鋒等研究表明，小麥各葉位葉片氮含量與熒光參數(shù)Fv/Fm和Fv/F0都呈極顯著正相關(guān)，且項(xiàng)部2張葉片的相關(guān)性最好。對(duì)于低、中、高蛋自質(zhì)含量的小麥品種類型，可以利用統(tǒng)一的冪函數(shù)回歸方程來(lái)描述頂部2張葉片氮含量隨Fv/F0的變化模式。這些初步的研究結(jié)果表明，葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)可以用來(lái)進(jìn)行植株?duì)I養(yǎng)診斷，但這方面的工作目前還報(bào)道較少。另外，對(duì)于葉綠素?zé)晒獾臏y(cè)定，目前還缺少一種簡(jiǎn)便、快速、廉價(jià)的新方法。

2.3 圖象及機(jī)器視覺技術(shù)

機(jī)器視覺是利用一個(gè)代替人眼的圖象傳感器獲取物體的圖象，將圖象轉(zhuǎn)換成數(shù)字圖象，并利用計(jì)算機(jī)模擬人的判別準(zhǔn)則去理解和識(shí)別圖象，達(dá)到分析圖象和作出結(jié)論的目的。作物在不同的營(yíng)養(yǎng)狀況下表現(xiàn)出不同莖葉顏色和形態(tài)是表征作物長(zhǎng)勢(shì)的重要信息，運(yùn)用圖象處理技術(shù)進(jìn)行作物營(yíng)養(yǎng)狀況的診斷主要是通過(guò)田間獲取數(shù)字圖象，運(yùn)用數(shù)字圖象處理、模式識(shí)別、景物分析和圖象理解等技術(shù)對(duì)圖象分析處理，從圖象中獲取作物的外部信息，作為圖象的特征向量，用于計(jì)算機(jī)處理、分類識(shí)別和決策診斷，來(lái)反映作物的生長(zhǎng)及氮素狀況。在作物營(yíng)養(yǎng)診斷中，通過(guò)圖象傳感器中的電子藕荷器CCD感應(yīng)作物冠層以及葉片的光反射和光吸收性質(zhì)來(lái)形成影象記錄，進(jìn)而通過(guò)圖象處理和分析技術(shù)獲取不同營(yíng)養(yǎng)狀況下的光譜差異以實(shí)現(xiàn)其整個(gè)診斷過(guò)程。近年來(lái)，可見光色彩分析技術(shù)成為新的研究熱點(diǎn)，并在推薦施月嘴方面進(jìn)行應(yīng)用。如Btackmer等通過(guò)分析彩色照片上的冠層相對(duì)亮度對(duì)玉米產(chǎn)量進(jìn)行了預(yù)測(cè)，紅、綠、藍(lán)三色光與玉米產(chǎn)量間都達(dá)到了極顯著相關(guān)關(guān)系。Dymond和Trotter使用CCD數(shù)碼相機(jī)通過(guò)航空攝影獲得森林和牧場(chǎng)的彩色圖象，有效評(píng)價(jià)了森林和牧場(chǎng)的植物冠層雙波長(zhǎng)的反射特性。Adamsen等應(yīng)用數(shù)碼相機(jī)獲取了冬小麥的冠層圖象，認(rèn)為綠光(G)與紅光(R)的比值G/R與冠層綠度存在顯著的相關(guān)性。Lukina等應(yīng)用數(shù)碼相機(jī)估計(jì)了冬小麥冠層生物量。Scharf等應(yīng)用普通可見光圖象對(duì)玉米的優(yōu)化施氮量進(jìn)行研究。Jia和cheng應(yīng)用數(shù)碼相機(jī)分別建立了拔節(jié)期和孕穗期冠層綠色深度與地上部植株全氮間的關(guān)系模型。這些研究工作都為基于數(shù)碼相機(jī)的彩色圖象處理技術(shù)和機(jī)器視覺色彩識(shí)別技術(shù)在農(nóng)作物生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。這表明，機(jī)器視覺己能較好模擬人眼的視覺特性，在對(duì)顏色的辨別和感應(yīng)上已遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了人眼的能力，將其和計(jì)算機(jī)圖象處理系統(tǒng)結(jié)合起來(lái)，在基于顏色特征的作物氮素診斷中具有明顯優(yōu)勢(shì)，勢(shì)必在作物氮素營(yíng)養(yǎng)檢測(cè)和診斷中具有廣闊的應(yīng)用前景。

3 光譜遙感分析技術(shù)

作物的光譜特征是由于作物的生理特征決定了其對(duì)光的吸收、透射和反射的變化，而作物的生理特征又相應(yīng)反映了它的長(zhǎng)勢(shì)情況，因而可以根據(jù)不同栽培條件下的光譜差異來(lái)監(jiān)測(cè)作物的生長(zhǎng)狀況。傳統(tǒng)的遙感光譜波段少，分辨率低，隨著遙感技術(shù)的發(fā)展，特別是高光譜遙感技術(shù)的出現(xiàn)和興起，可將光譜波段在某一特定光譜區(qū)域進(jìn)行細(xì)分，為作物的氮素營(yíng)養(yǎng)診斷注入了新的活力。高分辨率的地物光譜儀有可能用于簡(jiǎn)單、快速、非破壞性的估測(cè)植物冠層生化組成，其良好的前景正引起越來(lái)越多的農(nóng)學(xué)家關(guān)注，并已在大面積監(jiān)測(cè)植物營(yíng)養(yǎng)狀況的研究方面取得了明顯進(jìn)展。利用高光譜遙感技術(shù)，可以快速準(zhǔn)確地獲取作物生長(zhǎng)狀態(tài)以及環(huán)境脅迫的各種信息，從而相應(yīng)調(diào)整投入物質(zhì)的施用量，達(dá)到減少浪費(fèi)，增加產(chǎn)量，保護(hù)農(nóng)業(yè)資源和環(huán)境質(zhì)量的目的，是未來(lái)精確農(nóng)業(yè)和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要手段。為了探索植物葉片氮素遙感診斷的可能性，20世紀(jì)70年代以來(lái)有關(guān)科學(xué)家就進(jìn)行了大量的基礎(chǔ)研究，尋找氮素的敏感波段及其反射率在不同氮素水平下的表現(xiàn)。研究發(fā)現(xiàn)，許多植物在缺氮時(shí)無(wú)論是葉片還是植物冠層水平的可見光波段反射率都有所增加，對(duì)氮含量變化最敏感的波段在530-560mm區(qū)域通過(guò)光譜測(cè)定及其變量的運(yùn)算如近紅外與紅外與（NIR/Red）的比值，可以區(qū)分不同氮素營(yíng)養(yǎng)水平。明確了植物的氮素敏感波段后，許多學(xué)者便通過(guò)各種統(tǒng)計(jì)方法來(lái)尋求含氮量與光譜反射率或其演生量的關(guān)系，并建立模型來(lái)估算作物的氮素含量。Shibayma等在水稻上的研究發(fā)現(xiàn)，單位面積上的葉片氮含量與R620和R760的線性組合以及與R620和R880的線性組合均有較好的回歸關(guān)系，預(yù)測(cè)值和實(shí)測(cè)值線性相關(guān)，且不受品種類型的影響。Thomas等利用550nm和670nm這兩個(gè)波段定量估算甜椒的氮素含量，精度達(dá)90%。Fernandez等發(fā)現(xiàn)用紅(660nm)和綠(545nm)兩波段的線性組合可以預(yù)估小麥的氮含量，不受氮肥處理的影響。Johnson用逐步多元回歸方法發(fā)現(xiàn)在2160nm波段處樹葉葉片反射率的一階導(dǎo)數(shù)與葉片全氮間的相關(guān)性在整個(gè)可見光至紅外波段范圍內(nèi)最好，用光譜分析方法估測(cè)鮮葉含氮量其精度大于85%。Tarpley等分析了棉花葉片氮濃度與190個(gè)光譜比值指數(shù)的關(guān)系，并根據(jù)預(yù)測(cè)的精度和準(zhǔn)確度進(jìn)行聚類分析，表明用紅邊位置與短波近紅外波段的比值進(jìn)行氮素含量預(yù)測(cè)具有較高的精確度和準(zhǔn)確度。浦瑞良和宮鵬使用多元統(tǒng)計(jì)和光譜導(dǎo)數(shù)技術(shù)評(píng)價(jià)小型機(jī)載成像光譜儀(cASI)數(shù)據(jù)用于估計(jì)冠層生化濃度(總?cè)~綠素、全氮和全磷)的潛力和效率。牛錚等認(rèn)為用2120nm和1120nm處反射率一階導(dǎo)數(shù)的線性回歸方程可以預(yù)測(cè)鮮葉含氮量，結(jié)果實(shí)測(cè)值和預(yù)測(cè)值的相關(guān)程度在80%以上。Stone等用冠層反射光譜指導(dǎo)小麥變量施肥，明顯提高了總氮利用效率。由于植物冠層光譜反射特征受到植株葉片水分含量、冠層幾何結(jié)構(gòu)、土壤覆蓋度、大氣對(duì)光譜吸收等因素的影響，且在不同時(shí)空條件下影響因子有所變化，因而特定條件下所建立的植物氮素光譜診斷模型難以用于建模以外的時(shí)空條件，這就使利用遙感進(jìn)行作物氮素診斷的可靠性和普及性受到一定的限制。

4 結(jié)語(yǔ)

由上可知，在進(jìn)行作物氮素營(yíng)養(yǎng)狀況評(píng)判時(shí)，傳統(tǒng)的測(cè)試手段采取破壞性取樣，在取樣、測(cè)定、數(shù)據(jù)分析等方面需要耗費(fèi)大量人力、物力，且時(shí)效性差，不利于推廣應(yīng)用。所以在這一背景下，無(wú)損測(cè)試技術(shù)在作物氮素營(yíng)養(yǎng)診斷及推薦施肥中得到了廣泛的關(guān)注，被認(rèn)為是極有發(fā)展前途的作物營(yíng)養(yǎng)監(jiān)測(cè)與診斷技術(shù)，其特點(diǎn)是在不破壞植物組織結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，盡量利用各種手段對(duì)作物的生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)狀況進(jìn)行監(jiān)測(cè)。這種方法可以迅速、準(zhǔn)確的對(duì)田間作物氮營(yíng)養(yǎng)狀況進(jìn)行監(jiān)測(cè)，及時(shí)提供追肥所需要的信息。傳統(tǒng)的氮素營(yíng)養(yǎng)診斷無(wú)損測(cè)試方法主要有肥料窗口法和葉色卡片法，但這些方法均屬于定性或半定量的方法。近年來(lái)，隨著相關(guān)領(lǐng)域科技水平的不斷提高，氮素營(yíng)養(yǎng)診斷的無(wú)損測(cè)試技術(shù)正由定性或半定量向精確定量方向發(fā)展，由手工測(cè)試向智能化測(cè)試方向發(fā)展，由個(gè)體操作單元轉(zhuǎn)向群體面源檢測(cè)。如通過(guò)SPAD、機(jī)器視覺和光譜分析等技術(shù)，可以很好地?zé)o損檢測(cè)植株含氮狀況，進(jìn)而指導(dǎo)合理施氮和氮素調(diào)控，避免盲目施肥，以達(dá)到提高氮肥利用效率的目標(biāo)。由于地面光譜監(jiān)測(cè)模型精度較高，操作方便，不少研究者開發(fā)出多種作物氮素監(jiān)測(cè)儀，如Greenseeker光譜儀就是20世紀(jì)90年代中后期美國(guó)Oklahoma州立大學(xué)開發(fā)的目前國(guó)際上最先進(jìn)的一種地面主動(dòng)遙感高光譜儀器，實(shí)現(xiàn)了從白天到黑夜的幾乎所有光照條件下穩(wěn)定測(cè)定，是一種很好的大田尺度的推薦施肥工具，它通過(guò)觀測(cè)NDVI數(shù)據(jù)可分析作物長(zhǎng)勢(shì)，進(jìn)行氮素的實(shí)時(shí)診斷，提供最優(yōu)施肥方案。目前，基于高空遙感監(jiān)測(cè)模型預(yù)測(cè)精度偏低，因此需要將精度相對(duì)較高的地面光譜監(jiān)測(cè)模型與空間遙感信息相結(jié)合，建立作物長(zhǎng)勢(shì)及氮素營(yíng)養(yǎng)的遙感監(jiān)測(cè)預(yù)報(bào)模型，同時(shí)實(shí)現(xiàn)與地理信息系統(tǒng)(GIS)和全球定位系統(tǒng)(GPS)有機(jī)結(jié)合，用于大面積作物生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)和管理調(diào)控。因此，將地面遙感信息與空間多源遙感數(shù)據(jù)有機(jī)融合，有助于建立基于多信息源的作物氮素營(yíng)養(yǎng)監(jiān)測(cè)平臺(tái)，指導(dǎo)大尺度作物高效氮素管理和精確施肥。