微量加樣器（移液器）使用的一般原則

在免疫測定及其他生物醫(yī)學(xué)研究中，加樣器的使用離不開一次性的塑料吸頭，盡管一次性塑料吸頭的使用增加了實(shí)驗(yàn)費(fèi)用，但降低了實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員接觸傳染性病原體及有害實(shí)驗(yàn)材料如放射性核素的可能性，并且避免了吸頭多次重復(fù)使用所必需的清潔過程和腐蝕性去垢劑的使用。此外，在有些應(yīng)用上，如PCR測定中，吸頭必須是一次性的，以避免潛在污染發(fā)生的可能性。

加樣器根據(jù)使用的要求，也在不斷發(fā)展。如可整體高壓滅菌加樣器的出現(xiàn)。使用UV線穩(wěn)定的塑料制作加樣器對于加樣器在許多方面的應(yīng)用非常重要，使得在實(shí)際工作中，在超凈臺或抽風(fēng)柜的紫外線照射殺菌中，不必?fù)?dān)心置放其中的加樣器會因紫外線的作用而損壞其制作材料，進(jìn)而影響加樣功能。

加樣器根據(jù)其加樣的物理學(xué)原理和結(jié)構(gòu)的不同，其應(yīng)用特點(diǎn)也有所不同。活塞正移動加樣器無需任何校正，即可用于具不同化學(xué)組成和特性(密度和黏度)的液體的吸取加樣；相反，空氣墊加樣器的使用則較受局限。具有高蒸汽壓的液體如氯仿使用空氣墊加樣器吸取加樣通常不能得到跟吸取加樣蒸餾水相同的準(zhǔn)確度和精密度。由于在液體吸取過程中有部分蒸發(fā)，因而加樣的體積就會有所減少。可通過預(yù)先用液體濕潤吸頭數(shù)次，使得蒸汽相被液體飽和，可以改善加樣的準(zhǔn)確度。除此以外，為防止由高蒸汽壓引起液體從吸頭中漏出，可使用在底部有瓣的吸頭，此瓣只在其與管壁接觸的時(shí)候打開。使用空氣墊加樣器加樣，位于液體之上的空氣體積的膨脹依所加液體密度的不同而不同。當(dāng)吸取密度高于水的液體時(shí)，吸人吸頭的體積太低。例如，對于一個(gè)密度為1．1的較高濃縮的液體，誤差的量將達(dá)到o．2％。而吸取較稀的水溶液的這種誤差則可以忽略不計(jì)。因此，在吸取密度高的液體時(shí)，須對加樣器吸取體積的設(shè)定作相應(yīng)的校正，才能保證取到正確的體積。然而，在實(shí)驗(yàn)室實(shí)際工作中，加樣器使用者很少碰到要準(zhǔn)確吸取密度很高的液體的情況，故由于液體的密度所致加樣器使用受限的情況通常難以遇到。

一般來說，為防止所吸取體積上出現(xiàn)誤差，有一些基本的操作原則必須遵守。對吸取體積誤差影響的因素主要有三個(gè)方面：①流體靜壓；②吸頭潤濕；③流體動力學(xué)。當(dāng)樣本體積從毫升范圍降低至微升范圍時(shí)，物理作用力的關(guān)系即發(fā)生變化，對于加樣來說，其意味著液體表面的作用力效應(yīng)與其體積或質(zhì)量(例如重力)的作用力效應(yīng)相比有所增加，因此，加樣器生產(chǎn)廠家在設(shè)計(jì)和構(gòu)建加樣器和吸頭中必須仔細(xì)考慮這種情況，而且在使用時(shí)也必須注意。

流體靜壓：在吸取液體時(shí)，加樣器吸頭只能浸入液體幾毫升以確保與排出液體時(shí)相同的流體靜壓條件，因此，加樣器必須以幾乎垂直的方式加取液體，因?yàn)閮A斜的方式將減少液體柱的高度，導(dǎo)致吸取的液體過多。如果加樣器在30℃下以垂直方式吸取液體，可吸取至0．15％更多的液體。

吸頭潤濕：當(dāng)吸頭排空時(shí)，仍會有一些殘留的液體以薄膜6f形式保留在吸頭的側(cè)面，其量取決于液體和吸頭表面的相互作用，因此，其是一個(gè)常數(shù)，但依液體材料的不同而不同。對于水溶液，這種潤濕影響在構(gòu)建加樣器時(shí)就應(yīng)考慮。對于蛋白溶液等黏度高的液體，建議在加樣前吸打液體數(shù)次，以保證加樣的一致性。

流體動力學(xué)：對體積吸取的第三個(gè)影響是從加樣器吸頭外壁液體的釋放，在此過程中，吸頭的幾何形狀起一個(gè)關(guān)鍵的作用。為確保加樣中的穩(wěn)定條件，加樣器吸頭應(yīng)靠在管壁上，于是，液體可順著管壁流出，而不出現(xiàn)液滴，液滴的形成可由于其表面張力的作用而阻止液體從吸頭中釋放。如果吸頭安裝不正確或使用不相配的吸頭，相對加樣誤差將達(dá)到0．4％以上。

盡管空氣墊加樣器的使用有一定的局限性，但其優(yōu)點(diǎn)也是很明顯的，其所覆蓋的體積范圍大，使用易于掌握。此類加樣器很輕，可很容易地應(yīng)用于各種情況下的加樣。